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核酸检测试剂原材料有哪些呢,赶紧来看看吧
时间:2020-12-17 点击次数:5008
   核酸检测试剂原材料有哪些呢,赶紧来看看吧
  核酸检测试剂是基于核酸扩增检测技术的体外诊断试剂,包括等温扩增、PCR,qPCR等。现在有些实验室自己合成引物探针,生产qPCR诊断试剂,也有些试剂生产企业在问如何保证试剂生产过程的质量控制。
  检测试剂的生产质控与诊断试剂的评价既有相同点,因为都是基于相同的评价指标;又有不同点,生产过程会关注原料、半成品、成品,诊断试剂评价只针对成品。
  核酸检测试剂原材料有如下这些:
  1、dNTP
  脱氧三磷酸核苷,核酸的组成成分,包括:dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。应为HPLC纯、PCR级,无DNase和RNase污染。-20℃保存。
  2、引物
  由一定数量的核苷酸构成的特定序列,通常采用DNA合成仪人工合成,合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化。冻干粉,1800D以上。序列正确。纯度应达到电泳级(PAGE)或HPLC级,不含杂带。应提供合成机构出具的合成产物的质检证明,如PAGE电泳结果或HPLC分析图谱。应作HPLC分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度计测定OD260nm/OD280nm的比值在1、6~2、0之间,可视为合格引物。-20℃保存。
  3、探针
  是指特定的带有示踪物(标记物)的已知核酸片段(寡聚核苷酸片段),能与互补核酸序列退火杂交,用于特定核酸序列的探测。通常采用DNA合成仪人工合成,合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化,在5-端标记荧光素报告基团或其他发光标记物,在3-端标记荧光素淬灭基团,并经HPLC或其他适宜方法纯化。
  4、Taq DNA聚合酶
  具有DNA聚合酶活性,无核酸外切酶活性及核酸内切酶活性;具热稳定性,94℃保温1小时后仍保持50%活性。-20℃保存。
  5、UNG(尿嘧啶糖基化酶)
  具有尿嘧啶糖基化酶活性,无核酸外切酶及核酸内切酶活性,IU UNG在 37℃处理3分钟后,103拷贝以下含U模版应完全降解,不能产生扩增产物。-20℃保存。
  6、RT-PCR酶(反转录扩增酶)
  具逆转录酶活性和DNA聚合酶活性,无核酸外切酶及核酸内切酶活性;具热稳定性,94℃1小时后仍保持50%活性,-20℃保存。
  好了,以上便是关于核酸检测试剂的相关内容介绍了。

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